« Méthode d’étude en Histologie » .
• Histologie : Est la science des tissus, son but est l’étude de ces tissus et d’explorer leurs structure.
• Pour le démarche d’une étude histologique, On doit procéder à 4 étapes :
– Le choix du Matériel à étudier.
– La technique qui nous permet de visualiser les structures que l’on veut étudier.
– La production des images de ces structures.
– Le prélèvement de ces images (Diagnostique) .
Les différents types de prélèvement :
– Les frottis buccaux (Test de Barr / Test d’ADN) .
– Les frottis cervico-utérines (Dépistage).
– Les ponctions des liquides (Cytoponction mammaire).
– Les biopsies (Prélèvement d’un tissu de petite taille).
– Exérèse partielle ou complète dans un bloc opératoire.
=> Pour étudier un tissu , On prélève un échantillon de ce tissu et on le prépare à l’observation Microscopique par les étapes suivantes : Fixation / Inclusion / Coupes /
étalement / Coloration / Montage .
1. La fixation a pour but d’éviter la décomposition post-mortem et la digestion tissulaire par les enzymes ou les bactéries ! C-à-d,elle préserve l’architecture moléculaire des tissus .
Elle doit se faire juste après que le prélèvement est fait,Et la quantité du liquide fixateur doit être au moins 10 fois plus importante que le volume du tissu .
Les fixateurs utilisés :
– En microscopie Optique :
=> Le formol : qui pénètre rapidement et fixe lentement .
=> Le liquide de Boin (Formol + Acide picrique) : Pénètre lentement et fixe
rapidement .
– En Microscopie électronique :
=> Le glutaraldéhyde.
=> L’acide osmique .
2. L’inclusion, permet la réalisation des coupes Histologiques , Le milieu d’inclusion le plus utilisé en microscope optique est la paraffine .
La paraffine étant hydrophobe, donc le prélèvement doit subir une déshydratation dans des bains d’alcool croissant 70,80,90,95,99,100 °C, ensuite, il doit être immergé dans des bains de toluène (hydrocarbure), Une fois il est imprégné, Le tissu est placé dans la paraffine fondue de 56/58°C ; ensuite il est mis à l’air libre pour son durcissement.
Les milieux d’inclusion utilisés en ME : L’araldite/ L’epon.
3.Les coupes sont réalisées par :
– Un microtome : obtenir des coupes en MO de 2 à 5 μm, recueillies sur les lames en verres.
– Un ultra microtome : Obtenir des coupes en ME de 0,5 à 1 μm allant de 300 à 600 A°.
4.Pour utiliser une coloration, la paraffine doit être éliminée par :
– Déparaffinage dans des bains de Toluène.
– Réhydratation dans des bains d’alcool décroissant allant de 100 à 70 °C.
– Rinçage à l’eau distillée.
5.Les colorants de Routine utilisés sont :
– Hématine : colore les noyaux en VIOLET.
– Éosine : colore le cytoplasme en ROSE.
– Safran : Colore les fibres de collagène en JAUNE .
6.Pour l’observation de ces coupes ,on utilise :
– Un microscope optique de pouvoir séparateur de 0,2μm.
– Un microscope électronique de pouvoir séparateur de 0,2 nm.
R! Le pouvoir séparateur de l’œil humain est de 0,2mm .
Les différents types de microscope sont :
– MO (M.photonique) à lumière visible.
– MO à fluorescence à l’UV.
– ME à transmission .
– ME à balayage .
– ME dont la source est du LASER.
Bon courage
Remarques :
– Jetez un coup d’œil sur le fichier PDF envoyé par Dr.CHEBAB.
– La partie des FEUILLETS EMBRYONNAIRES, sera abordée dans le prochain cour
« Les épithéliums de revêtement »
– Pour l’introduction sur le tissu conjonctif, osseux, cartilagineux,sanguin ….. Vous n’aurez pas des questions à l’Examen sur ceux-ci, Sauf ce que vous avez fait en 1er
trimestre (épithéliums de revêtement / Les épithéliums glandulaires).
– Le Tableau, vous le trouverez à la fin du programme du 1er trimestre.